Молекулярната диагноза съответства на набор от молекулярни техники, които имат за цел да идентифицират промени в ДНК, които биха могли да са показателни за генетични заболявания или рак, например. Освен това широко се използват молекулярни техники за идентифициране и потвърждаване на инфекциозни заболявания, тъй като те представляват по-бърз и по-точен диагностичен метод.
Молекулярната диагноза е скъпа и следователно не се изисква много често от лекарите, но дава точни резултати по отношение на наличието на промяната, начина, по който може да попречи на функционирането на организма и реакцията на пациента на лечение.
За какво е това
Молекулярната диагноза може да се извърши с няколко цели, като основните са:
- Идентифициране на свързани с левкемия мутации, като идентифицирането на транслокация на BCR-ABL, което е характерно за хронична миелоидна левкемия (ХМЛ); Характерни мутации на хематологични заболявания, като наследствена хемохроматоза, полицитемия, есенциална тромбоцитемия и тромбофилия, например Молекулярни промени, които показват появата на рак, като колоректален, бял дроб, рак на гърдата и мозъка, например; Диагноза на инфекциозни заболявания, като хепатит, уретрит, токсоплазмоза, лайшманиоза и др., В допълнение към идентифицирането на вируса на HPV.
Молекулярната диагноза, въпреки че се счита за скъпа в сравнение с други диагностични техники, е по-точна, тъй като е в състояние да информира промяната, свързана с определено заболяване и степента на влияние на тази промяна в организма, като по този начин помага на лечението на човека.
Освен че се използват за диагностициране на различни заболявания, молекулярните техники се използват и за оценка на отговора на лечението, особено при хора с рак, като един от най-ефективните методи за индикация за прогресиране и рецидив на заболяването.
Как се прави
Молекулярната диагноза може да се извърши с всяка проба, като се изисква от лекаря тази, която може най-добре да предостави информация за състоянието на пациента, която може да бъде урина, слюнка или в повечето случаи кръв. Няма нужда от гладуване или друга подготовка за изпита.
Пробата се събира и изпраща в лабораторията заедно с указанията на лекаря, информиращи изпита или вида на изследването, което трябва да се направи. Извършената молекулярна техника зависи от искания изпит и включва поредица от точни процедури, които имат за цел да установят наличието или отсъствието на исканата от лекаря промяна.
Обикновено се използва само малко количество изпратена проба, като останалите се съхраняват, така че, ако е необходимо, изпитът се повтаря.
Вижте кои са основните молекулярни техники
PCR
PCR, съкратено за полимеразна верижна реакция или полимеразна верижна реакция , е молекулярна техника, която се състои в амплифициране на фрагмент от генетичен материал, или ДНК, или РНК, с цел идентифициране на мутации и по този начин да помогне при диагностицирането на заболявания,
Тази техника е направена от извличането и пречистването на генетичния материал, който след това се поставя в смес, в която един от компонентите е рестрикционен ензим, който варира според исканото изследване и чиято функция е да нарязва материала на фрагменти така че да се идентифицират възможните генетични изменения. Сместа се поставя в термоциклер, който е устройство, което действа чрез температурните колебания, посочени от специалиста според изпита и по този начин позволява усилването на генетичния фрагмент. В случай на конвенционален PCR, след амплификация, PCR продуктът се подлага на електрофореза, което е молекулярна техника, базирана на теглото и размера на фрагментите, тоест, според тези характеристики, се генерира лентова схема, чийто анализ се прави въз основа на положителната контролна лента, т.е. лентата, за която се знае, че съответства на генетичната промяна.
PCR в реално време, наричан още qPCR, е вид количествен PCR, тоест освен че идентифицира генетичната промяна, той е в състояние да предостави информация за генната експресия, тоест колко променен ген се експресира в организма., по този начин може да се използва за подпомагане на диагнозата и проследяване на лечението. PCR в реално време не изисква електрофореза, целият процес на амплификация и анализ на генетичен материал се извършва от устройство и резултатът се интерпретира от обучен здравен специалист.
секвениране
Секвенирането е молекулярна техника, която се състои в определяне на последователността на ДНК нуклеотиди, които са формиращите единици на генетичния материал. Секвенирането се получава от реакция, подобна на PCR, обаче в амплификационната смес се добавят модифицирани нуклеотиди чрез добавяне на флуорохроми, които като материал се амплифицират, модифицираните нуклеотиди се включват в ДНК и генерират няколко фрагмента, които съответстват на продукта за секвениране.
Продуктът на реакцията се поставя в устройство, наречено ДНК секвенсор, в което, тъй като фрагментите са достигнати от лазера на оборудването, флуорохромите се възбуждат, излъчвайки флуоресценция, която се обозначава от оборудването с пикове, като всеки пик съответства до нуклеотид. В края на реакцията оборудването ще информира последователността на ДНК, като по този начин ще може да помогне на лекаря в диагностицирането на генетични заболявания.
