Електрофореза: какво представлява, за какво е и как се прави

Електрофорезата е лабораторна техника, осъществявана с цел разделяне на молекулите според техния размер и електрически заряд, така че да може да се постави диагнозата на заболяванията, да се провери експресията на протеини или да се идентифицират микроорганизми.

Електрофорезата е проста и евтина процедура, използвана в лабораторни рутинни и изследователски проекти. Според целта на електрофорезата може да се наложи извършването на други тестове и изпити, за да се постигне диагноза, например.

За какво е това

Електрофорезата може да се извърши за няколко цели, както в изследователски проекти, така и при диагностициране, тъй като това е проста и евтина техника. По този начин електрофорезата може да се извърши за:

• Идентифицирайте вируси, гъби, бактерии и паразити, като най-често това е приложението в изследователски проекти; Тест за бащинство; Проверете експресията на протеини; Идентифицирайте мутациите, като полезни например при диагностицирането на левкемия; Анализирайте видовете циркулиращ хемоглобин, като полезен при диагностициране на сърповидно-клетъчна анемия; Оценка на количеството протеини, присъстващи в кръвта.

Според целта на електрофорезата може да се наложи извършването на други допълнителни тестове за лекаря, за да завърши диагнозата.

Как се прави

За да се направи електрофорезата е необходимо гелът, който може да бъде от полиакриламид или агароза в зависимост от целта, електрофореза буфер и вана, маркер за молекулно тегло и флуоресцентно багрило, в допълнение към UV или LED светлинно оборудване, познато още като трансилюминатор.

След приготвянето на гела трябва да се постави конкретен предмет, така че гнездата да се направят в гела, наричан в народно гребен, и да се остави гелът да се утаи. Когато гелът е готов, просто нанесете веществата върху кладенците. За това трябва да се постави маркер за молекулно тегло в една от ямките, положителна контрола, която е веществото, за което се знае какво е, отрицателна контрола, която гарантира валидността на реакцията, и пробите за анализ. Всички проби трябва да бъдат смесени с флуоресцентно багрило, тъй като по този начин е възможно визуализирането на лентите на трансилуминатора.

Гелът с пробите трябва да бъде поставен във ваната за електрофореза, която съдържа специфичния буферен разтвор, след което устройството се включва така, че да има електрически ток и съответно разлика в потенциала, което е важно за разделянето частици според натоварването и размера им. Електрофоретичното време на работа варира в зависимост от целта на процедурата и може да продължи до 1 час.

След определеното време е възможно да се види резултата от електрофоретичното преминаване през трансилюминатора. Когато гелът се постави под UV или LED светлина, е възможно да се визуализира схемата на превръзка: колкото по-голяма е молекулата, толкова по-малка е нейната миграция, все по-близо до ямката, докато колкото по-лека е молекулата, толкова по-голям е миграционният потенциал,

За да бъде валидирана реакцията, лентите на положителната контрола трябва да се визуализират и отрицателната контрола не трябва да се визуализира, тъй като в противен случай това е индикация, че е имало замърсяване и целият процес трябва да се повтори.

Видове електрофореза

Електрофорезата може да се извърши за различни цели и според нейната цел могат да се използват няколко вида гел, като най-често срещаният е полиакриламид и агароза.

Електрофорезата за идентифициране на микроорганизми е по-често да се извършва в изследователски лаборатории, но за диагностични цели електрофорезата може да се използва за идентифициране на хематологични заболявания и заболявания, които се развиват с увеличаването на количеството протеини, като основните видове електрофореза:

1. Електрофореза на хемоглобина

Електрофорезата на хемоглобина е лабораторна техника, която се извършва за идентифициране на различните видове хемоглобин, циркулиращ в кръвта, което позволява да се идентифицира наличието на заболявания, свързани с синтеза на хемоглобин. Типът хемоглобин се идентифицира чрез електрофореза при специфично рН, в идеалния случай между 8, 0 и 9, 0, като се проверява модел на лентите, които могат да се сравнят с нормалния модел, което позволява идентифициране на наличието на анормални хемоглобини.

Какво се прави за: Електрофорезата на хемоглобина се извършва за изследване и диагностициране на заболявания, свързани с синтеза на хемоглобин, като сърповидно-клетъчна анемия и хемоглобин С, в допълнение към това, че е полезно за диференциране на таласемия. Научете как да интерпретирате електрофорезата на хемоглобина.

2. Протеин електрофореза

Протеиновата електрофореза е изпит, поискан от лекаря, за да оцени количеството протеини, циркулиращи в кръвта, и по този начин да идентифицира заболявания. Този тест се прави от кръвна проба, която се центрофугира, за да се получи плазма, частта от кръвта, състояща се, наред с други вещества, от протеини.

След електрофореза може да се визуализира модел на ленти и впоследствие - графика, в която е посочено количеството на всяка фракция от протеини, което е основно за диагнозата.

За какво се прави: Електрофорезата на протеина позволява на лекаря да проучи появата на множествен миелом, дехидратация, цироза, възпаление, чернодробно заболяване, панкреатит, лупус и хипертония според схемата на лентата и графиката, представена в доклада за изследване, Разберете как се прави и как да разберете резултата от протеиновата електрофореза.